Hemoglobin S identification in blood donors: A cross section of prevalence

ABSTRACT Introduction: In Brazil, the sickle cell trait (SCT) has an average prevalence of 4% in the general population and 6-10% among Afro-descendants. Although SCT is highly prevalent, a large segment of the population ignores their status. The Therapeutic Guidelines prohibit the transfusion of SCT red blood cells into patients with hemoglobin disorders or severe acidosis and newborns. Methods: This was a cross-sectional study with data from 37,310 blood donation candidates. The study included only eligible first-time donors qualified to be tested for the presence of hemoglobin S (HbS) at the Fundação Hemominas Juiz de Fora, Brazil. The variables studied were gender, skin color, age, type of donation, place of birth, blood type, result of the solubility test for hemoglobin S (HbST) and hemoglobin electrophoresis (HbEF). Statistical analysis was performed using the Q square test and the Kappa index of agreement for comparing biochemical methods. This project was approved by the National Research Ethics Committee. Results: The analysis of first-time donor data showed that 7166 were considered eligible. A total of 127 of the 7166 donors were carriers of SCT (1.77%). Among the blood donors, 73.23% were from the local area. The HbST and HbEF were found to be 100% in concordance. Sensitivity was not tested in the present study. Conclusions: The HbST is highly specific for identifying the HbS, but sensitivity was not tested in this study. The screening of blood donors for abnormal hemoglobins is useful, helping to detect and counsel heterozygous people. The study seeks to identify the prevalence of SCT in a region of Brazil.

HCMV UL97 phosphotransferase gene mutations may be associated with antiviral resistance in immunocompromised patients in Belém, PA, Northern Brazil

Abstract INTRODUCTION: Human cytomegalovirus is one of the causes of opportunist infections in immunocompromised patients, and is triggered by factors such as state of viral latency, weakened immune responses, and development of antiviral resistance to ganciclovir, the only drug offered by the public health system in Brazil to treat the infection. The goal of this study was to identify mutations that may be associated with antiviral resistance in immunocompromised patients. METHODS: Molecular analysis was performed in 82 blood samples and subjected to genomic DNA extraction by a silica-based method. Three sequences of the HCMV UL97 gene, which encodes a phosphotransferase protein required for activation of ganciclovir, were amplified by polymerase chain reaction. Pyrosequencing methods were applied to one external 2096-bp segment DNA and two internal sequences between nucleotides 1087 to 1828 to detect mutations in this gene. RESULTS: Approximately 10% of sequences contained mutations between nucleotides 377 and 594, in conserved regions of the UL97 gene, leading to amino acid changes. Eleven coding mutations were identified, including changes leading to amino acid substitutions, E596K and S604F, which were observed in 100% of samples and are described for the first time in Brazil. In addition, one mutation (A594V) that is associated with ganciclovir resistance was detected in a kidney transplant patient. CONCLUSIONS: Further studies to detect mutations associated with HCMV resistance to antiviral drugs are required to demonstrate the need to increase the variety and availability of drugs used to treat viral infections in the public health care system in Brazil.

Longitudinal assessment of mercury exposure in schoolchildren in an urban area of the Brazilian Amazon / Avaliação longitudinal da exposição ao mercúrio em crianças de uma área urbana na Amazônia brasileira

This study was a longitudinal assessment of mercury exposure in schoolchildren in an urban area of the Brazilian Amazon. The study population consisted of 90 children whose exposure levels were assessed by testing mercury levels in the umbilical cord blood and mothers' blood samples in 2000-2001, and in the children's hair and blood samples. The study also used a questionnaire on demographic and socioeconomic data, fish consumption, and self-reported disease history. Mean mercury level in hair in 2010 was approximately 1µg/g, ranging up to 8.22µg/g, similar to 2004 and 2006. These figures can be explained by low fish consumption. Mean blood mercury levels at birth exceeded 10µg/L, ranging up to nearly 60µg/L, which indicates mercury transfer across the placenta. There was a significant increase in blood mercury from 2004 to 2006 (p < 0.001), suggesting exposure through air pollution. The main exposure to mercury was during pregnancy.

O objetivo deste estudo foi realizar avaliação longitudinal da exposição de crianças de uma área urbana da Amazônia brasileira ao mercúrio (Hg). A população foi composta por 90 crianças, cuja exposição foi avaliada desde o nascimento por meio das análises dos teores de Hg no sangue do cordão umbilical e no sangue das mães em 2000/2001, e em amostras de cabelo e sangue das crianças. Os procedimentos incluíram também um questionário com informações demográficas, socioeconômicas, sobre consumo de peixes e morbidade referida. A média dos teores de Hg no cabelo em 2010 foi próxima a 1µg/g e sua amplitude 8,22µg/g, semelhantes aos anos 2004 e 2006, podendo ser explicada pela baixa ingestão de peixes. A média dos teores de Hg no sangue das crianças ao nascer ultrapassou 10µg/L e sua amplitude atingiu quase 60µg/L, indicando transferência do Hg através da barreira placentária. Ocorreu aumento significativo dos teores de Hg no sangue entre 2004 e 2006 (p < 0,001), sugerindo a possibilidade de exposição atmosférica ao Hg. O principal período de exposição ao Hg ocorreu durante a gestação.

Restriction enzyme analysis of the human cytomegalovirus genome in specimens collected from immunodeficient patients in Belém, State of Pará, Brazil / Análise de restrição enzimática do genoma viral do citomegalovírus humano em espécimes clínicos de pacientes imunodeficientes, Belém, Estado do Pará

INTRODUCTION: Human cytomegalovirus is an opportunistic betaherpesvirus that causes persistent and serious infections in immunodeficient patients. Recurrent infections occur due to the presence of the virus in a latent state in some cell types. It is possible to examine the virus using molecular methods to aid in the immunological diagnosis and to generate a molecular viral profile in immunodeficient patients. The objective of this study was to characterize cytomegalovirus genotypes and to generate the epidemiological and molecular viral profile in immunodeficient patients. METHODS: A total of 105 samples were collected from immunodeficient patients from the City of Belém, including newborns, hemodialysis patients, transplant recipients and HIV+ patients. An IgG and IgM antibody study was completed using ELISA, and enzymatic analysis by restriction fragment length polymorphism (RFLP) was performed to characterize viral genotypes. RESULTS: It was observed that 100 percent of the patients had IgG antibodies, 87 percent of which were IgG+/IgM-, consistent with a prior infection profile, 13 percent were IgG+/IgM+, suggestive of recent infection. The newborn group had the highest frequency (27 percent) of the IgG+/IgM+ profile. By RFLP analysis, only one genotype was observed, gB2, which corresponded to the standard AD169 strain. CONCLUSIONS: The presence of IgM antibodies in new borns indicates that HCMV continues to be an important cause of congenital infection. The low observed genotypic diversity could be attributed to the small sample size because newborns were excluded from the RFLP analysis. This study will be continued including samples from newborns to extend the knowledge of the general and molecular epidemiology of HCMV in immunodeficient patients.

INTRODUÇÃO: O citomegalovírus é um betaherpesvírus oportunista, causador de infecções persistentes e graves em pacientes imunodeficientes. As infecções recorrentes ocorrem devido à presença do vírus em estado de latência, em alguns tipos celulares, o que possibilita a pesquisa viral por métodos moleculares para auxiliar nos diagnósticos imunológicos, assim como traçar o perfil epidemiológico e molecular viral em pacientes imunodeficientes. O objetivo deste estudo foi caracterizar os genótipos de citomegalovírus e traçar o perfil epidemiológico e molecular viral em pacientes imunodeficientes. MÉTODOS: Um total de 105 amostras foi coletado de pacientes imunodeficientes da Cidade de Belém, incluindo recém-nascidos, hemodialisados, transplantados e pacientes HIV+. Foi realizada a pesquisa de anticorpos IgG e IgM pelo método ELISA e análise enzimática pelo método restriction fragment length polymorphism (RFLP) para caracterização dos genótipos virais. RESULTADOS: Foi observado que 100 por cento dos pacientes apresentavam anticorpos IgG, 87 por cento eram IgG+/IgM-perfil de infecção pregressa; e 13 por cento IgG+/ IgM+ sugestivo de infecção recente. O grupo dos recém-nascidos apresentou maior frequência (27 por cento) do perfil IgG+/IgM+. Na análise por RFLP, foi observado um único genótipo, o gB2, que corresponde ao padrão genotípico da cepa AD169. CONCLUSÕES: A presença de anticorpos IgM nos recém-nascidos indica que o vírus CMV continua sendo causa importante de infecção congênita; a baixa diversidade genotípica pode ser atribuída ao tamanho amostral devido a exclusão dos recém-nascidos na análise por RFLP. Esse estudo será continuado incluindo amostras de recém-nascidos a fim de contribuir para um amplo conhecimento da epidemiologia geral e molecular do citomegalovírus em pacientes imunodeficientes da Cidade de Belém.

Uso do ioga como recurso não-farmacológico no tratamento da hipertensão arterial essencial / Use of the yoga as a non-pharmacologic resource in the treatment of essential arterial hypertension

Os tratamentos não-farmacológicos são importantes no contexto terapêutico da hipertensão arterial. Estudos prévios têm mostrado os benefícios do ioga na redução dos níveis de estresse, reatividade vascular e função autonômica cardíaca em populações orientais. Objetivos: Avaliar os efeitos da prática do Hatha Yoga como recurso complementar no tratamento e controle da pressão arterial em pacientes com hipertensão arterial essencial atendidos em nível ambulatorial. Métodos: Foram estudados 16 pacientes (10 mulherese 6 homens) durante um mês com sessões semanais de ioga. O protocolo de iogaterapia envolveu exercícios de controle respiratório (pranayamas) e shavasana, uma postura associada às técnicas de relaxamento durante 60 minutos diários. As variáveis analisadas foram a variabilidade da freqüência cardíaca (VFC) no domínio do tempo, a pressão arterial sistólica (PAS), a pressão arterial diastólica (PAD) e o duplo-produto (DP). Os dados foram submetidos à análise estatística descritiva e ao teste t de Student pareado para análise do pûvalor. Resultados: Foram observadas redução da PAS (p < 0,01), da PAD (p < 0,05) e do DP (p < 0,01) sendo essas alterações associadas à melhora na VFC (índice SDNN p < 0,001). Conclusões: O Hatha Yoga poderia ser utilizado como recurso complementar no tratamento da hipertensão arterial, uma vez que sua prática está associada à melhora na função autonômica cardíaca, na redução da pressão arterial e da sobrecarga cardíaca em hipertensos.

Perfil sorológico e molecular da infecção pelo citomegalovírus em pacientes transplantados de Belém-PA / Serological and molecular profiles of cytomegalovirus infection in transplant patients from Belém-PA

O citomegalovírus (CMV) é uma das principais causas de morbimortalidade de pacientes imunodeficientes. Em indivíduos transplantados, a infecção pelo vírus pode levar a rejeição aguda do enxerto, devido à produção de citocinas em resposta à infecção. Foi realizado o diagnóstico laboratorial da infecção pelo CMV em 35 pacientes transplantados renais através dos métodos ELISA e PCR no sangue, sendo acompanhados 14 indivíduos nos períodos pré e pós-transplante. As análises foram efetuadas no Instituto Evandro Chagas para confirmar o diagnóstico clínico da infecção viral e descrever o perfil sorológico-molecular dos pacientes. Dos 14 indivíduos avaliados no pré-transplante, 78,5 por cento apresentavam IgG e 7,1 por cento IgM para infecção por CMV. Na sorologia dos 35 pacientes no pós-transplante obteve-se 100 por cento de positividade para IgG e 14,5 por cento para IgM. Indivíduos soronegativos no pré-transplante soroconverteram após o enxerto com presença de IgG e IgM. Na análise molecular, 17,1 por cento apresentaram DNA viral, e os perfis sorológico-molecular foram: 2,8 por cento IgGpositivo IgMpositivoPCRpositivo; 14,3 por cento IgGpositivoIgMnegativoPCRpositivo; 8,6 por cento IgGpositivoIgMpositivoPCRnegativo e 74,3 por cento IgGpositivoIgMnegativoPCRnegativo. O perfil sorológico-molecular predominante é compatível com o perfil epidemiológico de elevada circulação do vírus na população. O conjunto IgGpositivoIgMnegativoPCRpositivo sugere a possibilidade de reinfecção por reativação viral em 8,6 por cento dos pacientes transplantados que pode ter sido da cepa exógena do doador para o receptor.

Detecção do citomegalovírus humano em doadores de sangue através de PCR em tempo real / Detection of human cytomegalovirus in blood donors by real-time PCR

O citomegalovírus humano (HCMV) é um agente infeccioso da família Herpesviridae. Neste trabalho, perquisou-se HCMV através da PCR em Tempo Real, em 115 amostras de DNA extraído de leucócitos de indivíduos voluntários para doação de sangue no Centro de Hemoterapia do Pará. A presença do DNA viral foi evidenciada em 57 por cento dos indivíduos estudados, sendo que dois terços deles eram do sexo masculino, não tendo sido observada nenhuma relação significante entre faixa etária, gênero e presença do DNA viral. Os resultados através da PCR em Tempo Real nos permitem sugerir que os bancos de sangue introduzam a identificação do HCMV na escolha das amostras de sangue com leucócito que serão utilizadas em pacientes imunodeprimidos e mulheres em início de gestação, pelo fato do HCMV ser um vírus teratogênico.

Uso da cultura de células em testes diagnósticos laboratoriais em medicina e biologia / The use of cell culture in laboratory diagnostic tests in medicine and biology

A cultura de células, iniciada nos primórdios do século XIX, vem sendo cada vez mais adaptada à manutenção do metabolismo fundamental celular in vitro, permitindo o desenvolvimento da maioria das funções fisiológicas básicas inerentes a uma célula e ao conjunto delas (tecido). A permanência da informação genética trazida do organismo que lhe deu origem, faz com que as células em cultura correspondam a um modelo biológico "vivo" para um número cada vez maior de testes laboratoriais aplicados aos campos da Medicina e da Biologia. O advento da Biologia Molecular e o esclarecimento do papel das células-tronco no desenvolvimento do organismo tornaram a cultura de células uma ferramenta fundamental na elucidação e solução de problemas, visando a melhoria da qualidade de vida dos indivíduos, como, também, o aprimoramento da manutenção de espécies animais e vegetais. Este trabalho tem o objetivo de mostrar a importância do uso das culturas de células, chamando a atenção para a biodiversidade intra e inter-específica, observada principalmente na região Amazônica, como também para a adptabilidade das células in vitro.

Modificação do padrão respiratório melhora o controle cardiovascular na hipertensão essencial / Spontaneous respiratory modulation improves cardiovascular control in essential hypertension

FUNDAMENTO: Estudos recentes apontam os benefícios do controle da respiração na melhoria do barorreflexo, variabilidade da freqüência cardíaca e redução da pressão arterial em pacientes hipertensos. OBJETIVO: Avaliar os efeitos do treinamento com técnica de respiração lenta na modulação dos sistemas cardiovascular e respiratório de pacientes (n=10, homens e mulheres, com 45 a 60 anos de idade) com hipertensão arterial essencial, assistidos em ambulatório. MÉTODOS: No delineamento do estudo, cada paciente foi utilizado como controle de si mesmo, sendo a coleta de dados realizada antes e após o período de intervenção. Foram avaliados parâmetros como variabilidade da freqüência cardíaca, pressão arterial sistólica, pressão arterial diastólica, pressão arterial média, ventilometria, cirtometria torácica e análise estatística dos dados. O treinamento respiratório utilizou exercícios de baixa freqüência e foi realizado duas vezes por semana durante um mês. Cada sessão teve duração de 30 minutos. RESULTADOS: Os resultados demonstraram redução da pressão arterial sistólica, da pressão arterial diastólica e da pressão arterial média (p < 0,05 vs controle), aumento da variabilidade da freqüência cardíaca evidenciado pelo aumento da variância dos intervalos RR e índice SDNN, redução da freqüência respiratória (p < 0,01 vs controle), aumento do volume corrente (p < 0,01 vs controle), e aumento da expansibilidade torácica apical (p < 0,01 vs controle). CONCLUSÃO: A reeducação respiratória com a técnica de respiração lenta parece ser um bom recurso complementar para o controle tanto cardiovascular como respiratório em pacientes hipertensos.

BACKGROUND: Recent studies show that controlled breathing improves baroreflex and heart rate variability and lowers blood pressure in hypertensive patients. OBJECTIVE: To evaluate the effects of slow breathing training on cardiorespiratory system modulation of patients (n=10, men and women, ages ranging from 45 to 60) with essential hypertension seen in an outpatient setting. METHODS: According to the study design, each patient was used as his/her own control, and data were collected before and after the intervention. The following parameters were assessed: heart rate variability (HRV), systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP), mean arterial blood pressure (MAP), respirometry, chest expansion measurement, and statistical data analysis. Respiratory training was performed in 30-minute sessions held twice a week over one month using slow breathing exercises. RESULTS: Our results were as follows: a reduction in SBP, DPB, and MAP (p < 0.05 vs control); an increase in heart rate variability, as evidenced by greater RR interval variation and SDNN index; a decline in respiratory rate (p < 0.01 vs control); and an increase in tidal volume (p < 0.01 vs control) and thoracic expansibility (p < 0.01 vs control). CONCLUSION: Respiratory retraining using the slow breathing technique appears to be a useful adjunctive for cardiorespiratory control in hypertensive patients.

Fatores relacionados à progressão da disfunção crônica do enxerto em transplantes renais / Factors associated with the progression of chronic graft loss in 585 kidney transplatation recipients

O presente trabalho tem como objetivo analisar os fatores relacionados à perda crônica de enxerto em 585 transplantes renais. Métodos :O estudo admitiu pacientes submetidos ao primeiro transplante renal com sucesso e que apresentavam, a partir de algum momento de evolução, nível sérico de creatinina superior a 2 mgldl repetidamente. Foram divididos em três grupos 106 pacientes: grupo A (n = 32) com função renal estável; grupo B (n=30) com perda lenta e gradual de função renal e sem retorno à diálise; e grupo C (n=44) com evolução para perda de enxerto e com retorno à diálise. Resultados :O grupo C recebeu significativamente mais azatioprina e prednisona (61por cento) e menos ciclosporina e prednisona (7,0 por cento) ou esquema tríplice com azatioprina, prednisona e ciclosporina (32por cento) do que o grupo A e B. Enquanto o grupo A recebeu significativamente mais esquema tríplice (47por cento), significativamente mais pacientes do grupo C (64 por cento) do que do grupo A (9por cento) ou do grupo B (27 por cento) contraíram infecção viral ou bacteriana com redução de dose de imunossupressor e, posteriormente, evoluíram para uma rejeição crônica. Rejeição crônica diagnosticada por biópsia foi significativamente mais freqüente no grupo C (53por cento) do que no grupo A (22por cento). A presença de proteinúria foi mais freqüente no grupo C (84 por cento) do que nos outros dois grupos. Conclusão : A presença de proteinúria, a redução da dose de imunossupressor ou a ausência de ciciosporina e o diagnóstico histológico de rejeição crônica estiveram associados à progressão mais rápida da insuficiência renal crônica após o transplante renal.